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豬細(xì)小病毒抗體快速檢測卡操作說明書
【介紹】豬細(xì)小病毒(PPV)抗體金標(biāo)快速檢測卡采用了快 速免疫層析檢測技術(shù),用于檢測全血、血清中的細(xì)小 病毒抗體。把樣本加入到加樣孔后,與膠體金標(biāo)記的 PPV 抗原一起沿層析膜移動。若樣品中存在抗 PPV 抗 體時,與檢測線上的抗原結(jié)合而顯示酒紅色。如果樣 品中不存在 PPV 抗體時,則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。
【組份】 1 快速檢測卡 50 個 2 吸管 50 個 3 抗體滴度比色卡 1 張 4 一次性衛(wèi)生手套 1 包 5 說明書 1 份
【包裝規(guī)格】 50T/盒 。
【操作方法】 1. 采集全血分離血清(2000-3000 轉(zhuǎn)/分離心 5-15 分鐘,或 4℃過夜自然析出),或采用加抗凝劑的 全血作為檢測樣本。也可采用不加抗凝劑的全血, 但必須立即進(jìn)行檢測。
2. 撕開鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、干凈的 臺面上。
3. 采用配套吸管吸取已采集的樣本,緩慢、逐滴的準(zhǔn) 確滴加 3 滴到有“S"標(biāo)記的加樣孔內(nèi)。
4. 室溫下放置 10-20 分鐘判斷結(jié)果,超過 20 分鐘結(jié)果 無效。
【結(jié)果判定】 1. 陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C) 同時出現(xiàn)紫紅色線(圖一)。細(xì)小病毒抗體滴度越高, 檢測線(T)顏色越深。
2. 弱陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C) 同時出現(xiàn)紫紅色線,但檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)的顏色很 淺(圖二)。
3. 陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫 紅色線(圖三)。
4. 失效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)和檢測線區(qū)(T) 都不出現(xiàn)色線;或僅檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)色線(圖四、 五)。
【診斷參考】
1. 如果該豬未接種過細(xì)小病毒疫苗:
a) 當(dāng)被檢樣品檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn), 說明被檢測樣品中沒有細(xì)小病毒抗體。如果豬 群健康,則表示沒有細(xì)小病毒感染,應(yīng)當(dāng)及時 進(jìn)行細(xì)小病毒疫苗接種。如果出現(xiàn)相應(yīng)急性癥 狀,則不能排除有細(xì)小病毒感染。
b) 當(dāng)被檢樣品檢測線(T)處有明顯色帶出現(xiàn), 則該動物存在細(xì)小病毒野毒感染或既往感染, 應(yīng)進(jìn)一步觀察驗證。
2. 如果該豬已接種過細(xì)小病毒疫苗:
c) 當(dāng)被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤≥對照卡 中 1:40 效價時,說明細(xì)小病毒抗體的滴度較 高,已達(dá)到抵御野毒攻擊的保護(hù)水平,同時說 明豬只感染野毒的可能性較小。
d) 當(dāng)被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤<對照卡 中 1:40 效價時,說明細(xì)小病毒抗體效價未達(dá) 到抵御細(xì)小病毒野毒攻擊的最di保護(hù)滴度,存在感染野毒的風(fēng)險,建議進(jìn)行疫苗補種。
【注意事項】 1. 如發(fā)現(xiàn)過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2. 純水、自來水、生理鹽水不能作為陰性對照。
3. 本產(chǎn)品室溫陰涼保存即可(低于 30℃)。如冷藏 保存,需先將檢測卡平衡至室溫,再打開鋁箔袋 使用,防止層析膜吸潮。檢測卡從鋁箔袋中取出 后,應(yīng)盡快使用。
4. 請不要接觸檢測卡上“加樣孔"和“觀察窗"處 的層析膜。
5. 為保證檢出效果,盡量采用新鮮、無污染的樣本。 如樣本有大量血脂,會干擾檢測,對此,應(yīng)離心 處理后,避開油脂層取血清部分檢測。當(dāng)血液或 血清異常粘稠或不足時可用生理鹽水對倍稀釋后 再進(jìn)行檢測。
6. 采集的血清樣本如不能立即檢測,短期存放(48 小時)需置于 4℃,長期保存請置于-20℃以下。
7. 未加抗凝劑的全血標(biāo)本應(yīng)立即進(jìn)行檢測;如已發(fā) 生部分凝血,請分離血清進(jìn)行檢測。加抗凝劑的 全血標(biāo)本請于 24 小時內(nèi)進(jìn)行檢測,且勿冷凍;凍 融會使紅細(xì)胞破裂溶血,嚴(yán)重影響檢測效果。
8. 滴加樣本時,請將吸管前端與加樣孔保持 1 厘米 左右距離,以保證能準(zhǔn)確加樣;如距離過近,可造 成液滴體積減小或因滴數(shù)判斷誤差而造成加入樣 本量不準(zhǔn),均影響測試效果。
9. 樣本加入“加樣孔"時,應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生。加樣 量需控制在 100ul 左右(約 3 滴樣本)。過量樣本 加入不會提高檢測敏感度。特別是,過量的全血 樣本會使紅細(xì)胞淤積在“顯示孔"部位,導(dǎo)致層 析膜紅色本底過深,嚴(yán)重影響結(jié)果判斷。
10. 本類產(chǎn)品主要用于豬只樣品的檢測,能否用于其它 動物,目前尚未評價。
11. 抗體水平的高低只與檢測線(T 線)的深淺有關(guān), 與質(zhì)控線(C 線)的深淺無相關(guān)性。質(zhì)控線只要清 晰可見,就表示實驗有效。
12. 必須依據(jù)各地相關(guān)規(guī)定對用過的檢測卡及樣本作為 污染物,妥善處理。
【有效期】 貯存方法: 4 - 30oC 下貯存。
有效期: 12 個月。
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